بیان ژن پروتئین حرکتی جدایه ایرانی ویروس برگ بادبزنی مو در باکتری escherichia coli

thesis
abstract

چکیده ویروس برگ بادبزنی مو grapevine fan leaf virus (gflv) از خانواده comoviridae، یکی از مخرب ترین بیماری های مو در سراسر جهان می باشد. پیکره این ویروس دوذره ای، جورقطر و به قطر 30 نانومتر بوده و در طبیعت توسط نماتد xiphinema index منتقل می شود. این بیماری باعث زوال پیش رونده مو می گردد به طوریکه منجر به کاهش راندمان محصول تا بیش از 80% می شود. با توجه به محدودیت روشهای کنترل رایج این بیماری در تاکستانها، تولیدگیاهان تراریخته مقاوم به ویروس ابتدا از طریق بیان این ژن در باکتری و نهایتا بیان آن در گیاه از طریق مهندسی ژنتیک ، از اهداف انجام تحقیق حاضر بود. برخی استرین های gflv قادر به آلوده کردن گیاهانی نظیر cucumis sativus نمی باشند که این امر می تواند به دلیل عدم بیان ژن پروتئین حرکتی در گیاه باشد. این تحقیق می تواند در مطالعات مربوط به مقاومت میزبانی نقش احتمالی این پروتئین را مشخص کند. هدف اصلی در انجام تحقیق حاضر بررسی بیان ژن پروتئین حرکتی در باکتری escherichia coli rosetta بود تا با تولید آن، امکان تولید آنتی بادی نوترکیب در برابر آن فراهم گردد. به منظور تولید پروتئین حرکتی نوترکیب، بخشی از آر ان ای دوم ویروس که پروتئین حرکتی را رمز می کند، قبلا به کمک آغازگرهای اختصاصی از روی cdna تکثیر، همسانه سازی و تعیین توالی شده است. در این تحقیق از کلونی باکتریایی واجد ptz57gflvmp، پلاسمید به روش لیز آلکالینی استخراج و بعد از برش توسط آنزیم های bamhi و saci، قطعه مورد نظر به حامل بیان pet-21a(+) برش داده شده توسط آنزیم های bamhi و saci، اتصال داده شد. پس از بیان پروتئین حرکتی gflv در e. coli ، وزن مولکولی پروتئین نوترکیب استخراج شده در sds-page بررسی شد. وزن مولکولی این پروتئین در حدود 38 کیلودالتون بود که منهای تعداد اسیدآمینه های افزوده شده توسط حامل با اندازه پروتئین حرکتی gflv مطابقت داشت.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

تنوع ژنتیکی و فشار انتخاب وارد بر ژن پروتئین حرکتی ویروس برگ بادبزنی مو در جدایه های ایرانی

پروتئین حرکتی در ویروس­های گیاهی نقش­های متعددی بویژه حرکت از یک سلول-به-سلول را برای ایجاد آلودگی سیستمیک بر عهده دارد. پروتئین حرکتی در ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fanleaf virus, GFLV) با ایجاد ساختارهای لوله­ای شکل در پلاسمادسماتاها مسئول انتقال سلول-به-سلول ویروس در گیاهان میزبان است. در پژوهش حاضر تنوع ژنتیکی ژن پروتئین حرکتی GFLV در جدایه­های ایرانی جمع­آوری شده از تاکستان­های استان­ه...

full text

تنوع ژنتیکی و فشار انتخاب وارد بر ژن پروتئین حرکتی ویروس برگ بادبزنی مو در جدایه های ایرانی

پروتئین حرکتی در ویروس­های گیاهی نقش­های متعددی بویژه حرکت از یک سلول-به-سلول را برای ایجاد آلودگی سیستمیک بر عهده دارد. پروتئین حرکتی در ویروس برگ بادبزنی مو (grapevine fanleaf virus, gflv) با ایجاد ساختارهای لوله­ای شکل در پلاسمادسماتاها مسئول انتقال سلول-به-سلول ویروس در گیاهان میزبان است. در پژوهش حاضر تنوع ژنتیکی ژن پروتئین حرکتی gflv در جدایه­های ایرانی جمع­آوری شده از تاکستان­های استان­ه...

full text

همسانه سازی و بیان ژن پروتئین نوترکیب ویروس پیچیدگی برگ شلغم (tctv) در باکتری escherichia coli

چکیده ویروس پیچیدگی برگ شلغم ( turnip curly top virus, tctv) یک جمینی ویروسی جدید با ویژگی های منحصر به فرد است که در سال 1389 از ایران (فارس) گزارش شده است. مطالعه ویژگی های بیولوژیکی این ویروس، مستلزم برقراری یک روش ردیابی ویروس در طبیعت است. بدلیل کارائی بهتر روش های سرولوژیکی در شناسایی ویروس های گیاهی، در تحقیق حاضر اقدام به فراهم سازی بستری جهت تولید آنتی بادی و به تبع آن، ردیابی این ویر...

بیان پروتئین پوششی ویروس ایرانی پیچیدگی بوته چغندرقند در باکتری Escherichia coli

بیماری پیچیدگی بوته چغندرقند در ایران با دو گونه ویروس ایرانی پیچیدگی بوته چغندرقند (Beet curly top Iran virus, BCTIV) و ویروس پیچیدگی بوته چغندرقند (BCTVBeet curly top virus,)ایجاد می­ شود. به منظور بیان پروتئین پوششی BCTIV، قطعه کامل چارچوب خوانش V1 اینویروس، با تعبیه محل­ های برشی دو آنزیم Bam HIو Hind III به ترتیب در انتهای ¢5 آغازگرهای اختصاصی رو به جلو ...

full text

بیان ژن پروتئین پوششی ویروس تریستزای مرکبات در باکتری escherichia coli

ویروس تریستزای مرکبات( citrus tristeza virus ctv) مهمترین بیمارگر مرکبات می باشد و خسارت هنگفتی به صنعت تولید این محصول در دنیا وارد می کند. به دلیل گسترش و شیوع ctv در ایران، مدیریت کنترل آن اهمیت بسزایی یافته است. از این رو تشخیص به موقع، دقیق و ارزان بیماری نیاز به بکارگیری روشی مناسب دارد. امروزه روش( enzyme linked immunosorbant assay elisa) روشی معمول، معتبر و ارزان برای تشخیص ویروس در سطو...

15 صفحه اول

کاربرد ایمنوگلوبولین G خالص شده پروتئین‌های پوششی و حرکتی ویروس برگ بادبزنی مو توسط ستون DEAE سلولزی برای شناسایی ویروس برگ بادبزنی مو

در تحقیق حاضر از جدایه‌های بومی ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fan leaf virus (GFLV) برای تهیه آنتی‌بادی نوترکیب استفاده شد، بدین ترتیب ژن‌های پروتئین پوششی و حرکتی ویروس تکثیر و در پلاسمید pET21a همسانه‌سازی و به باکتری (Escherichia coli (BL21) منتقل شدند. پس از بیان ژن‌های مذکور پروتئین‌های بیان شده تخلیص و برای ایمنی زایی خرگوش استفاده شدند. پس از ایمنی‌زایی توسط پروتیئن-های پوششی و حرکتی، ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده کشاورزی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023